分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。它是带状光谱，反映了分子中某些基团的信息。可以用标准光图谱再结合其它手段进行定性分析。
分光光度计是将成分复杂的光，分解为光谱线的科学仪器，通过对这些光谱线进行成分分析进而确定测量样品的成分。是各种涉及水和废水分析领域的通用仪器，应用范围包括市政和工业废水，饮用水，加工过程用水，地表水，冷却水和锅炉补给水等。
分光光度计在使用过程中常常会出现测量误差，很多人下意识的认为是仪器的问题，其实不然......其误差来源包括很多种，以下几种就是常见的问题：
1、复色光对比耳定律的偏离
比耳定律成立的前提条件是人射光是单色光，但是精度再高的仪器，即使是双单色器的分光光度计，也只能获得近乎单色的光，无法获得纯单色光，它仍然含有狭窄光通带，具有复色光的性质。而复色光会导致比耳定律的正或负偏离。
固定狭缝的紫外分光光度计光谱带宽一般为1nm或2nm，可调狭缝的可以做到0.1nm；可见分光光度计带宽6nm、snm，甚至十几纳米。
光谱带宽应该是越小越好，但是,随着光谱分辨率的提高，仪器的灵敏度降低，所以，选择仪器时要综合考虑各种条件的影响。当溶液浓度较小且单色光较纯时，可近似认为符合比耳定律。
2、杂散光的影响
杂散光是指进人检测器的处于待测波长光谱带宽范围外的其他波长组分，它是光谱测量中误差的主要来源。
产生原因有:
分光光度计的色散元件、反射镜、透镜及单色器内壁灰尘等。在分光光度计工作波段边缘波长处，由于单色器透光率、光源辐射强度、检测器灵敏度都较低，杂散光的影响更为显著。
杂散光限制仪器的分析上限可引起严重的测量误差，实际工作中，在定量分析时，一般在吸收峰或其附近处测量样品吸光度，如果在分析波长处含有杂散光，这时样品的透光率较小，而杂散光大部分透过，使测量吸光度低于真实吸光度。
3、仪器噪声对测t的影响
仪器噪声也是仪器的一个重要指标，它表征仪器做稀溶液的能力。是叠加在待测量的分析信号中的不需要的信号，扫描100%T和0%T线，可观察到分光光度计的绝对噪声水平，如果仪器噪声较大，会掩盖较小的测量信号，一般用噪音的二倍来表示仪器的灵敏度。
4、波长和吸光度准确度
样品的每一个值都是在一定的波长下测得的，如果，波长误差很大，测出的值肯定不准。吸光度准确度也是用户对仪器的直接要求，更应引起足够的重视。
国家计量检定规程规定双光束紫外可见分光光度计透射比准确度为A级士0.6%， B级土1.0%。
此外分光光度计的使用要避免以下几种环境
1、不能在温度太高和太低及湿度太高的环境下进行使用。大家需要知道多的电子设备都是怕潮湿环境的，潮湿环境下使用不但设备精确度相对低，而且还易发生污染设备或者损坏设备的情况发生，包括使用环境温度太高和太低都不行，通常紫外可见分光光度计使用的合适温度范围在5摄氏度到35摄氏度之间。
2、不能在没有稳定性和不平稳的环境下使用。该设备在整个使用中最怕的就是没有好的稳定性发生一些强烈震动或者持续震动情况，在这种情况下会导致设备损坏情况的发生，想要避免紫外可见分光光度计要使用在一些有坚固稳定的工作台上才好。
3、不能使用在强的照明环境下。这种设备使用在强的照明环境下，尤其使用在日光直射的环境下就会导致设备工作的不正常，建议设备需要在室内照明不宜太强且避免日光直射下才能正常的使用。
4、不能使用在电风扇直吹的环境下。现在正值夏天环境温度高，很多使用者就想到用电风扇直吹设备的方法进行使用，事实上这种使用会造成设备的受损，建议需要在装有空调房屋内使用才行。
2024-09-23
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